过氧化氢通过上调高迁移率族蛋白损伤心肌的实验研究

摘要：目的：探讨过氧化氢（H2O2）通过高迁移率族蛋白（HMGB1）介导对心肌损伤的作用机制。方法胎鼠心肌细胞培养后，分为4组：对照组，H2O2不同浓度组（100μmol／L、200μmol／L、500μmol／L），H2O2（200μmol／L）＋乙酰半胱氨酸（NAC，200μmol ／L）组，H2O2（200μmol／L）＋HMGB1抗体（20μg／ml）组。检测心肌细胞活性、凋亡率、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）、HMGB1表达。结果（1）细胞活性：与对照组比较，心肌细胞活性随着H2 O2浓度的增加而降低（ t ＝－5．81，－9．59，－14．21， P均＜0．05）；NAC和HMGB1抗体可以明显减弱H2O2（200μmolL／）对细胞活性的抑制作用（ t ＝－2．98，－3．03，P ＜均0．05）。（2）LDH和CK的表达水平：与对照组比较，LDH和CK的表达量随着H2 O2的浓度增加而增加（ t LDH ＝9．78，15．37，18．13， t CK ＝11．29，20．35，26．17， P均＜0．05）。与H2O2（200μmolL／）组比，NAC和HMGB1抗体可以抑制LDH和 CK的表达（tLDH ＝－49．1，－4．22， t CK ＝－4．17，3．29， P均＜0．05）。（3）MDA表达和SOD活性：H2O2（100，200，500μmol／L）可以抑制心肌细胞SOD活性，增加MDA表达（ t SOD ＝－4．16，－65．9，－10．76， t MDA ＝3．98，51．6，9．47，P 均＜0．05）；与H2 O2（200μmol／L）组比，NAC和HMGB1抗体可以拮抗H2 O2对SOD和MDA的影响（ t LDH ＝－4．91，－4．22， t CK ＝－4．17，3．29， P均＜0．05）。（4） HMGB1的表达：与对照组比较，H2O2（100，200，500μmol／L）可明显增加心肌中HMGB1的表达（ t ＝12．94，21．08，25．81， P均＜0．05），与H2O2（200μmol／L）组比，NAC＋H2O2和HMGB1－Ab＋H2O2中HMGB1的表达明显降低（ t ＝－10．24，－8．09， P均＜0．05）。（5）心肌凋亡：与对照组比较， H2O2组（100、200、500μmol／L）心肌凋亡率明显增加（ t ＝7．52，13．06，16．61， P ＜0．05）；NAC＋H2 O2组和HMGB1＋H2 O2组心肌凋亡率较H2 O2（200μmol／L）组明显增加（ t ＝－4．89，－4．23， P ＜0．05）。结论 H2 O2诱导的氧化应激反应可以通过上调HMGB1表达，损伤心肌。